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Q Focurose XL

价 格:询价

规 格:25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L

产 地:中国

货 号:HL120306001L

品 牌:汇研生物


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产品概述

   为确保产品的性能和无忧的操作,使用前请仔细阅读本手册,有任何疑问请咨询本公司技术支持或当地的销售人员。

Q Focurose XL是强阴离子交换介质,适用于蛋白、多肽、核酸等所有带电的生物分子的分离纯化。高载量设计,多应用样品的初步捕获。

预装柱需联合层析系统或蠕动泵或注射器使用。


1 产品介绍

特点:

a.容易放大。

b.高载量。

c.高化学耐受性。

d.便于维护。

 

表1:Q Focurose XL 性能参数

基质

带葡聚糖链的6%高度交联的琼脂糖

粒径范围

45-165µm

平均粒径

90±5µm

介质类型

强阴离子交换

带电基团

-N+(CH3)3

离子载量

0.18-0.25mmol Cl-/ml介质

操作压力

≤0.3MPa

流速

≧300cm/h

pH稳定性

3-12(工作)/2-12(长期)/ 2-14(短期)

化学稳定性

常用缓冲液、1.0M氢氧化钠、8M 尿素、6M 盐酸胍、70%乙醇

避免使用

氧化剂、阴离子型去污剂、阴离子型缓冲液

贮存溶液

20%乙醇

贮存温度

4-30℃



2 选择指导

2.1 离子交换介质的选择

图1:离子交换介质的选择

说明:

a.当目标物所在溶液的pH˂目标物的等电点时,选择阳离子交换介质。

b.当目标物所在溶液的pH˃目标物的等电点时,选择阴离子交换介质。

c.所使用溶液的pH应该在离子交换介质的使用pH范围以内。

2.2 缓冲溶液的选择

表2:阴离子交换缓冲液

pH范围

缓冲盐

浓度(mM)

平衡离子

pKa(25℃)

4.3-5.3

N-Methylpiperazine

20

Cl-

4.75

4.8-5.8

Piperazine

20

Cl-或HCOO-

5.33

5.5-6.5

L-Histidine

20

Cl-

6.04

6.0-7.0

bis-Tris

20

Cl-

6.48

6.2-7.2

bis-Tris propane

20

Cl-

6.65

7.3-8.3

Triethanolamine

20

Cl-或CH3COO-

7.76

7.6-8.6

Tris

20

Cl-

8.07

8.0-9.0

N-Methyl-diethanolamine

20

SO42-

8.52

8.0-9.0

N-Methyl-diethanolamine

50

Cl-或CH3COO-

8.52

8.4-9.4

Diethanolamine

50

Cl-

8.88

8.4-9.4

Propane 1,3-Diamino

20

Cl-

8.88

8.6-9.6

bis-Tris propane

20

Cl-

9.10

9.0-10.0

Ethanolamine

20

Cl-

9.50

9.2-10.2

Piperazine

20

Cl-

9.73

10.0-11.0

Propane 1,3-Diamino

20

Cl-

10.55

10.6-11.6

Piperidine

20

Cl-

11.12


表3:阳离子交换缓冲液

pH范围

缓冲盐

浓度(mM)

平衡离子

pKa(25℃)

1.4-2.4

Maleic acid

20

Na+

1.92

2.6-3.6

Methyl malonic acid

20

Na+或Li+

3.07

2.6-3.6

Citric acid

20

Na+

3.13

3.3-4.3

Lactic acid

50

Na+

3.86

3.3-4.3

Formic acid

50

Na+或Li+

3.75

3.7-4.7

Succinic acid

50

Na+

4.21

4.3-5.3

Acetic acid

50

Na+或Li+

4.75

5.1-6.1

Succinic acid

50

Na+

5.64

5.2-6.2

Methyl malonic acid

50

Na+或Li+

5.76

5.6-6.6

MES

50

Na+或Li+

6.27

6.7-7.7

Phosphate

50

Na+

7.20

7.0-8.0

HEPES

50

Na+或Li+

7.56

7.8-8.8

BICINE

50

Na+

8.33

 

说明:

a.按照表2和表3选择缓冲溶液的种类和浓度。

b.错误的缓冲液(种类和浓度)会干扰分离效果(如分离度、载量、pH波动等)。

c.所使用缓冲液的pH应该在离子交换介质的使用pH范围内。

d.使用分析纯或者更高纯度的缓冲液。

e.在溶液配制后,须经过滤(平均粒径<45µm,用0.22µm过滤;45µm<平均粒径<165µm,用0.45µm过滤;平均粒径>165µm,用0.8µm过滤)和脱气处理(超声或负压)。

 

3 样品的制备

样品所在溶液要和平衡液保持一致,可以用平衡液稀释或透析/超滤/G25进行缓冲液置换。

样品过滤(平均粒径<45µm,用0.22µm过滤;45µm<平均粒径<165µm,用0.45µm过滤;平均粒径>165µm,用   0.8µm过滤)。

 

4 纯化流程(以XK16/10为例)

采用液滴对液滴(避免引入气泡)的方式将柱子连接到层析系统上。

用平衡液以5ml/min的流速冲洗5CV(CV指柱床体积,下同)。

用洗脱液以5ml/min的流速冲洗5CV。

用平衡液以5ml/min的流速冲洗10CV。

将样品以5ml/min的流速上样。

用平衡液以5ml/min的流速冲洗10CV。

用洗脱液以5ml/min洗脱5CV或20CV(根据前期筛选实验数据,采用阶梯式洗脱5CV/线性梯度洗脱20CV)。

用再生液以5ml/min的流速冲洗5CV。

备注:再生液=平衡液+1M NaCl,其它组分不变。


5 放大

保持柱床高度不变

5.2 保持线性流速不变

备注:若实际情况和实验室数据有偏差,可以维持停留时间不变。

 

6 维护

6.1平衡

柱子装填完成后,用平衡液以60cm/h的流速冲洗5CV或冲洗至电导和pH值恒定。

6.2再生

每次分离纯化后,用再生液以60cm/h的流速冲洗5CV或冲洗至电导和pH值恒定。

6.3在位清洗

在位清洗用于清洗再生没有清洗干净的物质,例如脂类、沉淀物、变性蛋白。

a.强离子结合蛋白

用2.0M NaCl以60cm/h的流速反向冲洗5CV。

b.沉淀物、疏水结合蛋白、脂蛋白

用1.0M NaOH以30cm/h的流速反向冲洗5CV。

c.脂类、强疏水蛋白。

用1.0M NaOH,30%异丙醇以30cm/h的流速反向冲洗5CV

6.4消毒

用1.0M NaOH以30cm/h的流速反向冲洗5CV。

6.5灭菌

将介质置换到0.5M NaCl ,pH 7.0的溶液中进行高压灭菌。

6.6保存

介质在20%乙醇中4-30℃保存。

 

7 订购信息

表4:订购信息表

产品

规格

货号

Q Focurose XL

25ml

HL120306025M

Q Focurose XL

100ml

HL120306100M

Q Focurose XL

500ml

HL120306500M

Q Focurose XL

1L

HL120306001L

Q Focurose XL

5L

HL120306005L

Q Focurose XL

20L

HL120306020L

备注:大规格包装产品或其它产品购买,请咨询本公司当地销售或售前技术支持。


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Q Focurose XL

  • Q Focurose XL 使用说明书

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    详细介绍:

    Q Focurose XL是强阴离子交换介质,适用于蛋白、多肽、核酸等所有带电的生物分子的分离纯化。高载量设计,多应用样品的初步捕获。


Q Focurose XL

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