为确保产品的性能和无忧的操作，使用前请仔细阅读本手册，有任何疑问请咨询本公司技术支持或当地的销售人员。

   MMA Focurose HP是一种多模式生物分离介质，主要应用于单抗的中度纯化和精细纯化（用于去除Protein A纯化后样品中的Protein A*、二聚体、多聚物、宿主细胞蛋白、核酸），也可以应用于其它生物分子的精细纯化（去除二聚体、多聚物、宿主细胞蛋白、核酸等）。

   *:在Protein A-4HF使用过程中可能脱落的极微量Protein A。

1 产品介绍

图1：MMA Focurose HP的配基是一种多模式配基，它与目标分子存在许多类型的相互作用，主要是离子作用(强阴离子作用)，其次是氢键作用和疏水作用等。

特点：

a.在高电导条件下结合带电分子，样本不再受电导的限制，样本不需要前处理就可进行离子交换。

b.载量高，采用流穿模式时具有更高处理量。

c.和传统离子交换介质相比，具有新的选择性。

d.小颗粒，高分辨率。

表1：MMA Focurose HP 性能参数

2 选择指导

2.1 离子交换介质的选择

图2：离子交换介质的选择

说明：

a.当目标物所在溶液的pH˂目标物的等电点时，选择阳离子交换介质。

b.当目标物所在溶液的pH˃目标物的等电点时，选择阴离子交换介质。

c.所使用溶液的pH应该在离子交换介质的使用pH范围以内。

2.2 缓冲溶液的选择

表2：推荐缓冲液

说明：

a.选择的缓冲液和盐可能会干扰性能。

b.电导调节可以通过添加盐或改变缓冲液的浓度。

c.在溶液配制后，须经过滤（平均粒径<45µm，用0.22µm过滤；45µm<平均粒径<165µm，用0.45µm过滤；平均粒径>165µm，用0.8µm过滤）和脱气处理（超声或负压）。

3 样品的制备

样品所在溶液要和平衡液保持一致，可以用平衡液稀释或透析/超滤/G25进行缓冲液置换。

样品过滤（平均粒径<45µm，用0.22µm过滤；45µm<平均粒径<165µm，用0.45µm过滤；平均粒径>165µm，用   0.8µm过滤）。

4 纯化流程（以XK16/10为例）

采用液滴对液滴（避免引入气泡）的方式将柱子连接到层析系统上。

用平衡液以3ml/min的流速冲洗5CV（CV指柱床体积，下同）。

用洗脱液以3ml/min的流速冲洗5CV。

用平衡液以3ml/min的流速冲洗10CV。

将样品以3ml/min的流速上样。

用平衡液以3ml/min的流速冲洗10CV。

用洗脱液以3ml/min洗脱5CV或20CV(根据前期筛选实验数据，采用阶梯式洗脱5CV/线性梯度洗脱20CV)。

用再生液以3ml/min的流速冲洗5CV。

备注：再生液=平衡液+2M NaCl，其它组分不变。

5 放大

保持柱床高度不变

5.2 保持线性流速不变

备注：若实际情况和实验室数据有偏差，可以维持停留时间不变。

6 维护

6.1平衡

柱子装填完成后，用平衡液以60cm/h的流速冲洗5CV或冲洗至电导和pH值恒定。

6.2再生

每次分离纯化后，用再生液以60cm/h的流速冲洗5CV或冲洗至电导和pH值恒定。

6.3在位清洗

在位清洗用于清洗再生没有清洗干净的物质，例如脂类、沉淀物、变性蛋白。

a.强离子结合蛋白

用2.0M NaCl以60cm/h的流速反向冲洗5CV。

b.沉淀物、疏水结合蛋白、脂蛋白

用1.0M NaOH以30cm/h的流速反向冲洗5CV。

c.脂类、强疏水蛋白。

用1.0M NaOH，30%异丙醇以30cm/h的流速反向冲洗5CV

6.4消毒

用1.0M NaOH以30cm/h的流速反向冲洗5CV。

6.5灭菌

将介质置换到0.5M NaCl ,pH 7.0的溶液中进行高压灭菌。

6.6保存

介质在20%乙醇中4-30℃保存。

7 订购信息

表3：订购信息表

备注：大规格包装产品或其它产品购买，请咨询本公司当地销售或售前技术支持。