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MMC Focurose HR

价 格:询价

规 格:25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L

产 地:中国

货 号:HF190805001L

品 牌:汇研生物


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产品概述

   为确保产品的性能和无忧的操作,使用前请仔细阅读本手册,有任何疑问请咨询本公司技术支持或当地的销售人员。

   MMC Focurose HR是一种多模式耐盐生物分离介质,适用于蛋白、多肽、核酸等所有带电的生物分子的中度纯化和精细纯化。

 

1 产品介绍

图1:MMC Focurose HR的配基是一种多模式配基,它与目标分子存在许多类型的相互作用,主要是离子作用,其次是氢键作用和疏水作用等。

 

特点:

a.在高电导条件下结合带电分子,样本不再受电导的限制,样本不需要前处理就可进行离子交换。

b.处理样本体积大。

c.和传统离子交换介质相比,具有新的选择性。

d.高流速、高分辨率。

表1:MMC Focurose HR 性能参数

名称

MMC Focurose HR

基质

高刚性琼脂糖

粒径范围

45-165µm

平均粒径

≈75µm

介质类型

复合模式

离子载量

80-120umol H+/ml 介质

pH稳定性

2-14(短期)3-12(长期)

操作压力

≤0.5MPa

最大流速

600cm/h

化学稳定性

所有常用缓冲液、1.0M氢氧化钠、8M尿素、6M盐酸胍、70%乙醇

避免使用氧化剂、阳离子去污剂、阳离子缓冲液

贮存溶液

20%乙醇

贮存温度

4-30℃

 

2 选择指导

2.1 离子交换介质的选择

图2:离子交换介质的选择

 

说明:

a.当目标物所在溶液的pH˂目标物的等电点时,选择阳离子交换介质。

b.当目标物所在溶液的pH˃目标物的等电点时,选择阴离子交换介质。

c.所使用溶液的pH应该在离子交换介质的使用pH范围以内。

2.2 缓冲溶液的选择

表2:推荐缓冲液

pH范围

缓冲盐1

浓度2(mM)

4.0-5.5

Acetate

20-100

3.0-6.5

Citrate

20-200

5.5-6.5

Bis-Tris

20-50

6.0-7.5

Phosphate

20-200

7.5-9.0

Tris

20-50

8.8-10.6

Glycin-NaOH

20-100

 

说明:

a.选择的缓冲液和盐可能会干扰性能。

b.电导调节可以通过添加盐或改变缓冲液的浓度。

c.在溶液配制后,须经过滤(平均粒径<45µm,用0.22µm过滤;45µm<平均粒径<165µm,用0.45µm过滤;平均粒径>165µm,用0.8µm过滤)和脱气处理(超声或负压)。

 

3 样品的制备

样品所在溶液要和平衡液保持一致,可以用平衡液稀释或透析/超滤/G25进行缓冲液置换。

样品过滤(平均粒径<45µm,用0.22µm过滤;45µm<平均粒径<165µm,用0.45µm过滤;平均粒径>165µm,用   0.8µm过滤)。

 

4 纯化流程(以XK16/10为例)

采用液滴对液滴(避免引入气泡)的方式将柱子连接到层析系统上。

用平衡液以5ml/min的流速冲洗5CV(CV指柱床体积,下同)。

用洗脱液以5ml/min的流速冲洗5CV。

用平衡液以5ml/min的流速冲洗10CV。

将样品以5ml/min的流速上样。

用平衡液以5ml/min的流速冲洗10CV。

用洗脱液以5ml/min洗脱5CV或20CV(根据前期筛选实验数据,采用阶梯式洗脱5CV/线性梯度洗脱20CV)。

用再生液以5ml/min的流速冲洗5CV。

备注:再生液=平衡液+2M NaCl,其它组分不变。

 

5 放大

保持柱床高度不变

5.2 保持线性流速不变

备注:若实际情况和实验室数据有偏差,可以维持停留时间不变。


6 维护

6.1平衡

柱子装填完成后,用平衡液以60cm/h的流速冲洗5CV或冲洗至电导和pH值恒定。

6.2再生

每次分离纯化后,用再生液以60cm/h的流速冲洗5CV或冲洗至电导和pH值恒定。

6.3在位清洗

在位清洗用于清洗再生没有清洗干净的物质,例如脂类、沉淀物、变性蛋白。

a.强离子结合蛋白

用2.0M NaCl以60cm/h的流速反向冲洗5CV。

b.沉淀物、疏水结合蛋白、脂蛋白

用1.0M NaOH以30cm/h的流速反向冲洗5CV。

c.脂类、强疏水蛋白。

用1.0M NaOH,30%异丙醇以30cm/h的流速反向冲洗5CV

6.4消毒

用1.0M NaOH以30cm/h的流速反向冲洗5CV。

6.5灭菌

将介质置换到0.5M NaCl ,pH 7.0的溶液中进行高压灭菌。

6.6保存

介质在20%乙醇中4-30℃保存。

 

7 订购信息

表3:订购信息表

产品

规格

货号

MMC Focurose HR

25ml

HF190805025M

MMC Focurose HR

100ml

HF190805100M

MMC Focurose HR

500ml

HF190805500M

MMC Focurose HR

1L

HF190805001L

MMC Focurose HR

5L

HF1908051005L

MMC Focurose HR

20L

HF1908055020L

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MMC Focurose HR

MMC Focurose HR

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