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PS Focurose HPL

价 格:询价

规 格:25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L

产 地:中国

货 号:HQ220325001L

品 牌:汇研生物


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产品概述

  为确保产品的性能和无忧的操作,使用前请仔细阅读本手册,有任何疑问请咨询本公司售后技术支持或当地的销售人员(联系方式见附录)。

 

1.产品介绍

PS Focurose HPL是一种特定的亲和填料,适用于部分病毒、病毒样颗粒以及某些特定的抗原和蛋白(见表2)的分离纯化。

特点:

a.快速、简单(一步纯化)。

b.载量高。

c.易于放大。

表1:性能参数

介质

PS Focurose HPL

基质

高刚性琼脂糖

粒径范围

45-165µm

平均粒径

90±5µm

溶菌酶载量

≥3mg/ml介质

pH稳定性

5-12(长期) 5-12(短期)

操作压力

≤0.3MPa

流速

≧300cm/h

贮存溶液

20%乙醇

贮存温度

4-30℃

 

表2:PS Focurose HPL适用性

Viruses

Viral/Microbial Agents

Rabies

Influenza

Japanese Enchephalitis

Feline Leukemia

Feline Herpes

Feline Calicivirus

Respiratory Syncytial Virus

Human Herpes Simplex

Human Measles

Human Parainfluenza

Herpes Simplex gA and gB Glycoprotein Subunits

Hepatitis B Surface Antigen

Filamentous Hemagglutinin from B. pertussis

Leucocytosis Promoting Factor Hemagglutinin

 

2.溶液配制

平衡液:0.01M PB,调节pH 7.2,4-8℃保存。

洗脱液:0.01M PB、1.0M NaCl,调节pH 7.2,室温保存。

备注:平衡液pH为7.2±0.2,在平衡液中可经添加0.1M NaCl抑制少量杂质的吸附,取决样品特性;洗脱时可以把NaCl可增加到2M来提高洗脱能力。

 

3.样品的制备

a.样品所在溶液盐的组分及pH必须和平衡液保持一致,可以通过用平衡液稀释或透析、超滤、G25进行缓冲液置换处理。

b.样品过滤(粒径≤45µm用0.22µm过滤、粒径≤165µm用0.45µm过滤、粒径≤300µm用0.8µm过滤,避免堵塞离子交换介质)。

备注:不建议直接用强酸或强碱调整样品溶液的pH,可能会出现目标物的降解和失活。

 

4.纯化流程(以XK16/10为例)

4.1用纯化水以5ml/min冲洗5CV。

4.2用平衡液以5ml/min冲洗10CV。

4.3将样品以2.5ml/min上样,上样完成后用平衡液进行清洗直至基线平稳。

4.4用洗脱液以5ml/min洗脱10CV,并收集洗脱液。

4.5用纯化水以5ml/min冲洗5CV。

4.6用保存液以5ml/min冲洗后保存。

 

5.清洗(以XK16/10为例)

清洗后可以去除一些强结合性物质(例如一些强结合的蛋白、变性蛋白、脂类等),从而达到恢复介质的优良性能(例如载量、流动性、柱效等)。

建议每使用5-10次后进行一次清洗,具体清洗频率需根据纯化的初始样品的洁净度进行调整。

5.1用3M NaCl以1ml/min的流速冲洗10CV。

5.2用0.1M NaOH以1ml/min的流速冲洗20CV。

5.3用3M NaCl以1ml/min的流速冲洗10CV。

5.4用纯化水以5ml/min的流速冲洗10CV。

5.5用保存液以5ml/min的流速冲洗5CV。

 

6.常见问题

表3:常见问题及解决方案

问题

可能原因

解决方案

纯化时目标物不与介质结合

或结合量较低

1.上样量过载

降低上样量

2.上样流速过快

降低上样流速

3.蛋白或脂类在介质中聚集

及时有效地清洗介质或更换新的介质

4.目标物不带电或与介质带同样的电荷

筛选合适的结合缓冲液

5.样本或平衡液中盐浓度和pH不正确

检查样品和平衡液中的电导和pH

6.选用了错误的缓冲液

参考缓冲液选择表

7.样品中加入了不合适的去污剂

检查样品中是否有不合适的去污剂

洗脱时没有收集到目标物

或只收集到少量目标物

1.目标物没有与介质结合或结合量较少

先确认目标物是否与介质结合

2.洗脱条件不合适

洗脱液洗脱能力不够,加大盐浓度和调整洗脱液pH

3.洗脱时间不够

降低流速,延长洗脱液的保留时间

4.洗脱体积过小

加大洗脱体积

5.目标物在洗脱液条件下出现聚集沉淀

检测目标物在洗脱液条件(盐浓度和pH)下的溶解度和稳定性。

目标物纯度较低

 

1.样品没有经过前处理

样品上柱前必须要经过离心或过滤

2.样品粘度过高

用平衡液适当的稀释样品,降低粘度。

3.洗杂不彻底

加大洗杂体积直至基线平稳并与平衡液一致

4.杂质蛋白或脂类在介质中聚集沉淀

及时有效地清洗介质

5.洗脱条件不佳

优化洗脱条件

6.目标物出现降解

检测目标物的稳定性

7.柱料装填效果不佳

重新装填或购买

8.分离柱顶部有较大储样体积

重新装柱或降低储样体积

9.介质中有微生物生长

介质使用完后,请及时正确保存介质

介质载量下降

1.上样流速过快

降低上样流速

2.蛋白或脂类在介质中聚集,导致载量下降。

及时清洗介质

3.使用次数过多,配基被氧化或脱落

及时清洗介质或更换新介质

色谱峰上升过陡

介质装填过紧

重新装柱

色谱峰上升过缓或拖尾

介质装填太松

重新装柱

柱床有裂缝或干涸

出现泄露或大体积气泡引入

检查管路是否有泄露或气泡,重新装柱

液流较慢

1.蛋白或脂类聚集

及时清洗介质或滤膜

2.蛋白沉淀在介质中

调整平衡液和洗脱液组分,以维持目标物的稳定性和介质的结合效率

3.分离柱中微生物生长

所用试剂必须经过过滤和脱气;

样品上柱前必须离心或过滤

 

7.订购信息

表4:订购信息表

产品

规格

货号

PS Focurose HPL

25ml

HQ220325025M

PS Focurose HPL

100ml

HQ220325100M

PS Focurose HPL

500ml

HQ220325500M

PS Focurose HPL

1L

HQ220325001L

PS Focurose HPL

5L

HQ220325005L

PS Focurose HPL

20L

HQ220325020L

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PS Focurose HPL

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