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Plasmid Focurose HPR

价 格:询价

规 格:25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L

产 地:中国

货 号:HQ190220001L

品 牌:汇研生物


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产品概述

   为确保产品的性能和无忧的操作,使用前请仔细阅读本手册,有任何疑问请咨询本公司售后技术支持或当地的销售人员(联系方式见附录)。

 

1.产品介绍

Plasmid Focurose HPR纯化原理是利用配基的嗜硫吸附,适用于分离纯化闭环的超螺旋质粒DNA。

特点:

a.快速、简单(一步纯化)。

b.载量高、流速快、易于放大。

表1:介质性能参数

基质

高刚性琼脂糖

粒径范围

25-45um

平均粒径

35±5um

结合载量1

≥2mg(pDNA)/ml(介质)

pH稳定性

3-11(长期)

2-13(短期)

化学稳定性

所有常用缓冲溶液中稳定

30%异丙醇、70%乙醇、1M醋酸、0.5M NaOH

流速

≥150cm/h

操作压力

≤0.5MPa

贮存溶液

20%乙醇

贮存温度

4-8℃

 

2.溶液制备

平衡液:2.1M (NH4)2SO4、10mM EDTA、100mM Tris-HCl, pH 7.5。

洗脱液:0.3M NaCl、1.7M (NH4)2SO4、10mM EDTA、100mM Tris-HCl, pH 7.5。

 

3.样品制备

3.1样品是经过Focurose FF初步纯化的收集组分。

3.2样品过滤(平均粒径<45µm,用0.22µm过滤;45µm<平均粒径<165µm,用0.45µm过滤;平均粒径>165µm,用   0.8µm过滤)。

 

4.纯化流程(以XK16/10为例)

4.1采用液滴对液滴(避免引入气泡)的方式将柱子连接到层析系统上。

4.2用纯化水以4ml/min的流速冲洗10个CV。

4.3用平衡液以4ml/min的流速冲洗5个CV。

4.4将样品以4ml/min的流速上样。

4.5用平衡液以4ml/min的流速冲洗5个CV。

4.6用洗脱液以2.5ml/min的流速冲洗5个CV。

4.7用纯化水以4ml/min的流速冲洗10个CV。

4.8用保存液以4ml/min的流速冲洗5个CV。

 

5.清洗(以XK16/10为例)

5.1用纯化水以4ml/min的流速冲洗5个CV。

5.2用0.5M NaOH以1ml/min的流速冲洗5个CV。

5.3用纯化水以4ml/min的流速冲洗10个CV。

5.4用平衡液以4ml/min的流速冲洗5个CV。

5.5用纯化水以4ml/min的流速冲洗5个CV。

5.6用保存液以4ml/min的流速冲洗5个CV。

 

6.常见问题

表2:常见问题及解决方案

问题

可能原因

解决方案

纯化时目标物不与介质结合

或结合量较低

1.上样量过载

降低上样量

2.上样流速过快

降低上样流速

3.目标物和介质结合力弱

增加平衡液中(NH4)2SO4浓度

洗脱时没有收集到目标物

或只收集到少量目标物

1.目标物没有与介质结合或结合量较少

先确认目标物是否与介质结合

2.洗脱时间不够

降低流速,延长洗脱液的保留时间

3.洗脱体积过小

加大洗脱体积

目标物纯度较低

 

1.样品没有经过前处理

上柱前必须要经过过滤

2.样品粘度过高

用平衡液适当的稀释样品,降低样品粘度和浓度。

3.洗杂不彻底

加大洗杂体积直至基线平稳并与平衡液一致

4.杂质蛋白或脂类在介质中聚集沉淀

及时有效地清洗介质

5.柱料装填效果不佳

重新装填或购买

6.分离柱顶部有较大储样体积

重新装柱或降低储样体积

7.介质中有微生物生长

介质使用完后,请及时正确保存介质

介质载量下降

1.上样流速过快

降低上样流速

2.蛋白或脂类在介质中聚集,导致载量下降

及时清洗介质

3.使用次数过多,配基逐渐脱落

更换新介质

色谱峰上升过陡

介质装填过紧

重新装柱

色谱峰上升过缓或拖尾

介质装填太松

重新装柱

柱床有裂缝或干涸

出现泄露或大体积气泡引入

检查管路是否有泄露或气泡,重新装柱

液流较慢

1.蛋白或脂类聚集

及时清洗介质或滤膜

2.分离柱中微生物生长

所用试剂必须经过过滤和脱气;

样品上柱前必须离心或过滤

 

7.订购信息

表3:订购信息表

产品

规格

货号

Plasmid Focurose HPR

25ml

HQ190220025M

Plasmid Focurose HPR

100ml

HQ190220100M

Plasmid Focurose HPR

500ml

HQ190220500M

Plasmid Focurose HPR

1L

HQ190220001L

Plasmid Focurose HPR

5L

HQ190220005L

Plasmid Focurose HPR

20L

HQ190220020L

备注:大规格包装产品或其它产品购买,请咨询本公司当地销售或售前技术支持。


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Plasmid Focurose HPR

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Plasmid Focurose HPR

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Plasmid Focurose HPR

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